Сифилис - Лечение кожи

Ифа на сифилис

Трепонемные тесты на сифилис. Общее описание.

При проведении диагностических тестов на сифилис, применяются различные серологические реакции: агглютинации, преципитации, иммунофлюоресценции, связывания комплемента, иммуноферментный анализ и др. В основе всех этих серологических реакций лежит взаимодействие антигенов и антител

Ифа на сифилис

Специфические серологические тесты называются трепонемными потому, что в этих тестах используются бледные трепонемы или их антигены, то есть антигены трепонемного происхождения.

Цель трепонемных тестов — выявление специфических антител к антигенным структурам возбудителя сифилиса, то есть антител, направленные конкретно против самих бактерий T.

Pallidum, а не против тканей организма, поврежденных трепонемой. Специфические противотрепонемные антитела класса IgM могут быть обнаружены уже в конце второй недели заболевания.

Как и в нетрепонемных тестах, при проведении трепонемных тестов используется реакция «антиген-антитело». Для проведения и обнаружения результатов реакции «антиген-антитело» используют более сложные и дорогие методы, чем в случае нетрепонемных тестов.

Своевременное и качественное распознавание сифилитической инфекции связывается в настоящее время с широким внедрением трепонемных тестов. 

Трепонемные тесты используют, чтобы подтвердить наличие сифилиса — с их помощью проверяют результаты нетрепонемных тестов, что особенно необходимо при диагностике скрытых форм сифилиса. Трепонемные тесты также применяются для выявления сифилиса на ранних стадиях, когда нетрепонемные кардиолипиновые тесты (реакция Вассермана, реакция микропреципитации и др.) отрицательные. 

Трепонемные тесты применяются только для диагностики сифилиса и не используются для проведения контроля излеченности, т/к трепонемные реакции у некоторых больных могут оставаться положительными в течение многих лет после полноценного лечения сифилиса.

Однако, при проведении трепонемных тестов, в небольшом числе исследований могут встречаться ложноположительные результаты, особенно при наличии у пациента таких заболеваний, как инфекционный мононуклеоз, болезни соедининтельной ткани, лепра или инъекционная наркомания. 

По клинической специфичности трепонемные тесты сопоставимы с нетрепонемными, по клинической чувствительности – превосходят их.

Причины ложноположительных результатов

Реакция Вассермана может определять «острый» и «хронический» ложноположительный результат. Его выраженность зависит от характера изменений состояния человека. Показывать стадию обострения RW может в таких случаях:

Ифа (иммуноферментный) анализ крови на сифилис: как сдавать анализ

  • инфекционные заболевания в стадии обострения;
  • травматические повреждения;
  • инфаркт миокарда;
  • введение любой вакцины за несколько дней до пробы;
  • пищевое отравление.

Типы анализов на сифилис

Диагностика сифилиса имеет некоторые особенности и отличается от диагностики других бактериальных инфекций. Сложное строение и антигенные свойства бледной трепонемы обусловливают ошибки в интерпретации результатов серологических реакций.

Как интерпретировать тесты на сифилис?: В мировой медицинской ...

Сдать анализ крови на сифилис предлагают 3 основным группам пациентов:

  1. 1Скрининг и диспансеризация групп населения (в том числе и беременность, постановка на учет в женской консультации, поступление на работу и оформление медкнижки и так далее).
  2. 2Скрининг в группах риска (незащищенные половые контакты с человеком, инфицированным сифилисом, лица после принудительных сексуальных контактов, ВИЧ-инфицированные и так далее).
  3. 3Лица, имеющие симптомы заболевания, или лица с подозрением на сифилитическую инфекцию.

Все лабораторные методы условно подразделяют на прямые и непрямые.

Прямые методы

  1. 1Идентификация Treponema pallidum в тёмном поле (темнопольная микроскопия).
  2. 2Заражение подопытных животных (культивирование в лабораторных животных).
  3. 3ПЦР (полимеразно-цепная реакция).
  4. 4ДНК-зонд или гибридизация нуклеиновых кислот.

Непрямые методы

Серологические реакции — это методы лабораторной диагностики, базирующиеся на обнаружении антител (сокращенно АТ) к антигенам бледной трепонемы (сокращенно АГ). Они имеют основное значение для подтверждения диагноза.

  1. 1Нетрепонемные тесты:
    • Реакция Вассермана (РСК);
    • Реакция микропреципитации (МР, РМП) и ее аналоги, которые приведены ниже;
    • Тест быстрых плазменных реагинов (RPR, РПР);
    • Тест с красным толуидином и сывороткой (TRUST);
    • Нетрепонемный тест Лаборатории исследования венерических болезней — VDRL.
  2. 2Трепонемные тесты:
    • Р-ция иммобилизации Treponema pallidum – РИБТ/РИТ;
    • Р-ция иммунофлюоресценции – РИФ, FTA (разведения сывороток РИФ-10, РИФ-200, РИФ-абс);
    • Р-ция пассивной гемагглютинации (РПГА, ТРПГА, TPHA);
    • Иммуноферментный анализ (ИФА, EIA);
    • Иммуноблоттинг.
Алгоритм серодиагностики сифилиса

Рисунок 1 — Алгоритм серодиагностики сифилиса

Гистоморфологические методы

Эти методы сводятся к выявлению особенностей гистоморфологии сифилитических проявлений. Внимание уделяется тонкостям строения твёрдого шанкра.

Однако, дифференциальная диагностика инфекции с помощью гистологии весьма затруднительна. Гистоморфология используется с другими лабораторными и клиническими тестами.

Методы клинических исследований стремительно совершенствуются с каждым годом. С разработкой новых  способов диагностики, ложноположительная реакция на сифилис встречается всё реже.

При необходимости диагностика может включать в себя несколько разных методик – это позволяет получить наиболее достоверный результат.

Нетрепонемные методы исследования

Эти методики направлены на выявление белков, которые образуются в результате активности бледной спирохеты. Они направлены на определение «следов» возбудителя.

Такие методы имеют относительно высокий процент погрешности (до 10%). Подобные методики являются неспецифичными, но позволяют по титру антител определять степень заражения.

Реакция Вассермана RW

Наиболее распространённым анализом, который проводится для выявления бледной трепонемы, является серологическое исследование крови. Реакция Вассермана позволяет всего за несколько минут определить наличие болезни.

Поэтому данная методика применяется в лабораториях чаще всего – она не требует много времени и имеет относительно низкую стоимость.

Для выполнения анализа используется спинномозговая жидкость или кровь. Забор исследуемого материала может осуществляться из пальца (если анализ всего один) или из вены (если требуется проведение нескольких исследований).

В результате проведения анализа может быть не только ложноположительный, но и ложноотрицательный. Он возможен при следующих обстоятельствах:.

  • ранняя стадия заражения, когда количество трепонем в организме ещё низкое;
  • хроническое заболевание в стадии затихания, когда число антител снижается.

Для выявления болезни используют различные методики и биоматериалы. На ранних этапах сифилис определяют с помощью бактериоскопического теста.

Образцы исследуют под микроскопом. Прибор позволяет обнаружить штаммы возбудителя.

Позднее проводят серологические анализы. Благодаря им, в пробах выявляют антигены и антитела к болезни.

Способы определения половой инфекции поделены на 2 категории:

  • Прямые, выявляющие патогенный микроорганизм. К ним относят: темнопольная микроскопия, RIT-анализ (инфицирование кроликов биоматериалом для исследования), метод ПЦР – полимеразной цепной реакции (с его помощью находят генетические элементы возбудителя).
  • Непрямые (серологические) позволяют обнаружить антитела к патогену. Они продуцируются иммунной системой, как ответная реакция на заражение.

Серологические методики поделены на 2 категории: трепонемные и нетрепонемные.

Нетрепонемные, включающие: тест с толуидиновым красным, анализ РСК, RPR- тест, исследование крови экспресс-методом РМП.

Трепонемные, объединяющие: иммуноблоттинг, РСК-тест, РИТ-анализ, исследование РИФ, РПГА-тест, ИФА-анализ.

Информативность тестов на инфекцию различна. Чаще делают основные виды анализов на сифилис, к которым отнесены серологические методики. Пациентам, нуждающимся в обследовании, врач назначает тесты индивидуально.

Биоматериал для исследования

Чтобы выявить бледную трепонему – патогена, который выглядит, как спираль и вызывает сифилис, берут пробы:

  • венозной крови;
  • ликвора (секрета из спинномозгового канала);
  • содержимое лимфатических узлов;
  • ткани изъязвлений.

Если необходимо провести тесты на обнаружение сифилиса, кровь сдают не только из локтевой вены, но и из пальца. На выбор биоматериала и способ исследования влияет тяжесть течения инфекции и оснащенность диагностического центра.

Лабораторные анализы на выявления трепонемы называются серодиагностикой. Серодиагностика сифилиса условно подразделяется на две группы:

  • Специфические анализы, дающие положительную пробу даже после излечения заболевания;
  • Неспецифические анализы, показывающие результат, при наличии в конкретное время заболевания.

Как называется анализ на сифилис? Исследования в зависимости разделают на 2 группы:

Специфические анализы:

  • Сифилис рпга, что расшифровывается как реакция пассивной агглютинации или сифилис трна, что переводится — Treponema pallidum haemagglutination;
  • РИФ или реакция иммунофлюоресценции;
  • РИТ или реакция иммобилизации трепонем;
  • Иммуноферментный анализ;
  • Иммуноблот на сифилис или иммуноблоттинг;

 Наиболее известны следующие трепонемные тесты:

  • Реакция связывания комплемента (реакция Вассермана) с трепонемным антигеном (РСКт).
  • Реакция иммунофлюоресценции (РИФ; Fluorescent treponemal antibody, FTA). Она применяется в нескольких модификациях: РИФ-200 (FTA-200); РИФ-абс (FTA-abs; FTA-abs double staining; FTA-abs IgM; РИФ-абс-IgM; 19S-IgM-FTA-abs); РИФц — реакция иммунофлюоресценции с цельной кровью.
  • Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА; Treponema pallidum haemagglutination assay, TPHA).
  • Реакция пассивной агглютинации желатиновых частиц, сенсибилизированных антигенами возбудителя сифилиса (TPPA, Treponema pallidum particle agglutination assay)
  • Иммуноферментный анализ (ИФА; Enzyme Lynced Immunosorbent Assay, ELISA).
  • ИХЛ — иммунохемилюминесцентное исследование (ИХЛ; Chemiluminescence immunoassays, CLIA)
  • Реакция иммобилизации бледных трепонем РИБТ (РИТ), в зарубежной литературе TPI (Treponema pallidum immobilization test). В последние годы используется все реже и только в научных целях и в исследовательских лабораториях.
  • Иммуноблотинг (ИБ; Western Blot, Line Blot). Как правило, используется метод линейного иммуноблотинга, являющийся вариантом иммуноферментного анализа. Применяется в двух вариантах: для выявления IgG и IgM-антител к возбудителю сифилиса 
ПОДРОБНЕЕ ПРО:  Сифилис: симптомы, признаки. Как лечить сифилис

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА) и иммуноферментный анализ (ИФА) на антитела классов IgM, IgG и суммарные имеют универсальное значение и применяются как для скрининга, так и для подтверждения диагноза.

Эти методики просты и доступны в проведении, имеют высокую воспроизводимость, автоматизированы. При применении ИФА или РПГА обязательным условием является использование в повторном анализе той же тест-системы, что и при первичном обследовании.

РИФ (fluorescent treponemal antibody, FTA) основана на визуализации при люминесцентной микроскопии комплексов антигенов с антителами с помощью сыворотки против Ig человека, меченной флюорохромом.

Методы РИФ, ИФА, иммуноблоттинг (ИБ) позволяют выявить специфические антитела к антигенам T. pallidum (при сифилисе результаты тестов становятся положительными) с 3-й недели от момента заражения и ранее, РПГА и РИБТ – с 7–8-й недели.

Из наиболее распространенных специфических трепонемных тестов в мировой практике, в которых используется реакция агглютинации, можно перечислить следующие. В РПГА (Treponema pallidum hemagglutination assay, ТРНА),  реакции микрогемагглютинации (microhemagglutination assay for Treponema pallidum, MHA-TP) при положительном результате происходит агглютинация эритроцитов, сенсибилизированных (обработанных) трепонемным антигеном, в присутствии антитрепонемных антител. Использование в качестве носителя латекса или желатиновых частиц в тесте ТРРА (Treponema pallidum particle agglutination) позволяет применять нагрузочный тест в случае лизиса эритроцитов (распада эритроцитов из-за разрушения их мембраны) сыворотками некоторых больных, а также придает стабильность реагентам. 

Трепонемные тесты

Антиген Улавливающая система Тест

Живые патогенные трепонемы

Взвесь живых трепонем

РИТ, РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем)

Интактные трепонемы Трепонемы, фиксированные на стеклах

РИФ (реакция иммунофлуоресценции), РИФ-абс (РИФ с абсорбцией), РИФ-ц, РИФ с капиллярной кровью из пальца и т.п.

Очищенные и разрушенные ультразвуком трепонемы Связаны с эритроцитами РПГА (реакция пассивной гемагглютинации)
Связаны с желатиновыми частицами Реакция агглютинации частиц (TPPA)
Связаны с поверхностью лунок микропланшета ИФА

Белки, разделенные методом электрофореза в полиакриламидном геле и перенесенные на мембраны методом вестерн-блоттинга

Иммуноблоттинг
Рекомбинантные Связаны с поверхностью лунок микропланшета Рекомбинантный ИФА

Белки, разделенные методом электрофореза в полиакриламидном геле и перенесенные на мембраны методом вестерн-блоттинга

Иммуноблотинг с рекомбинантными АГ
Связаны с частицами латекса Латекс-агглютинация

Диагностировать болезни возможно посредством прямых и непрямых способов. Сама бледная трепонема выявляется только прямым методом.

Непрямой же метод обнаруживает антитела к спирохете. Если найдены антитела, то это подтверждает наличие спирохеты в организме.

К непрямым способам диагностики относятся серологические реакции, объектом исследования которых является сыворотка крови.

Антитела можно обнаружить в процессе их контактирования с антигенами. Поэтому для проведения серологической реакции употребляются вещества с содержанием заданного антигена. По типу данного антигена реакции подразделяются на трепонемные и нетрепонемные:

  • Трепонемная реакция проходит с выявлением антител к антигенам трепонемы.
  • К нетрепонемным относятся реакции, обнаруживающин антитела к липопротеидам разрушенных трепонем или клеток человеческого организма.

Важно! Так как последние мало чем отличаются от липопротеидов тканей животных, то итог анализа на сифилис может оказаться ложноположительным. Кардинально подтвердить диагноз заболевания может только положительная трепонемная реакция.

Для диагностики применяют весь арсенал обследований. Обычно для подтверждения диагноза необходимы несколько анализов.

Для диагностики применяют весь арсенал обследований. Обычно для подтверждения диагноза необходимы несколько анализов.

Подтверждаем или исключаем сифилис: анамнез, симптомы, анализы

Подтвердить или исключить диагноз может только дерматовенеролог. Уролог или гинеколог могут лишь заподозрить болезнь по внешним признакам. И тогда они должны направить пациента к дерматовенерологу для дальнейшего обследования, лечения и наблюдения.

Обследование на сифилис Минск (ИФА) | komzdrav-minsk.by

Диагноз «сифилис» основывается на совокупности следующих признаков:

  1. На наличии или отсутствии внешних проявлений и симптомов.
  2. На результатах минимум двух лабораторных исследований: нетрепонемного (РМП, или RW, или RPR) и трепонемного (РПГА или ИФА) тестов.
  3. На данных о том, был ли сифилис ранее, и проводили ли уже его лечение.

Если симптомы присутствуют

РПГА RPR сифилис
Основные тесты на сифилис — RPR и РПГА
  • Наиболее очевидным и обоснованным диагноз считается тогда, когда имеются клинические симптомы и подтверждающие результаты двух анализов: RPR (или RW, РМП) и РПГА (или ИФА).
  • Если же при наличии симптомов результаты анализов расходятся, и RPR отрицательный, а РПГА (или ИФА) положительный, проводят дополнительный трепонемный тест — ИФА (или РПГА, если вначале проводился ИФА). В случае положительного дополнительного анализа диагноз считается доказанным и проводится лечение, в случае отрицательного — кровь отправляют в экспертную лабораторию.
    Отрицательный RPR при положительном ИФА/РПГА встречается обычно в позднем периоде. Тогда на наличие инфекции обязательно исследуют спинномозговую жидкость (РИФ-ц, РИТ).
  • Обратная ситуация, когда RPR положительный, а РПГА отрицательный (или сомнительный) встречаются крайне редко. Это возможно в первые 3–4 недели после появления твердого шанкра, а также во вторичном периоде во время иммунной «прозоны» (чрезмерно большого количества антител). В этом случае анализ рекомендуется повторить.
RPR/
RW/
РМП
РПГА ИФА Лечение проводилось Диагноз Дальнейшая тактика
+ + + «Сифилис» Лечение
+ + «Поздний сифилис» Исследование спинномозговой жидкости. Лечение

Если внешних признаков нет

Тогда диагностика усложняется. Здесь врачи опираются только на анализы и сведения о проводимом или непроводимом ранее лечении.

Варианты в этом случае:

  • Если нетрепонемный (один из РМП/RW/RPR) и трепонемный тест (РПГА/ИФА) — положительны, проводится дополнительный альтернативный трепонемный тест (ИФА, если первый тест был РПГА, и наоборот — РПГА, если был ИФА). Если тест становится отрицательным, то кровь пациента направляют в экспертную лабораторию и проводят дополнительные анализы. В случае если второй трепонемный тест становится положительным, ставят диагноз: «скрытый сифилис».Такое состояние может наблюдаться некоторое время после проведенного лечения. Если пациенту было проведено до этого лечение, то для того чтобы подтвердить диагноз, проводят дополнительное исследование на IgM. При положительных результатах — диагноз подтверждается, но исследование все равно рекомендуется повторить через 2 недели. При отрицательных результатах сифилис опровергается.
  • Если нетрепонемный тест (РМП/RW/RPR) отрицательный, а трепонемный (РПГА/ИФА) положительный, то состояние может оцениваться как «поздний сифилис» или «отсутствие сифилиса», если пациенту было проведено ранее полноценное лечение. Для разграничения этих двух состояний проводят дополнительный тест на IgM (ИФАIgM, РИФ-абс-IgM, Иммуноблоттинг-IgM). Если IgM в крови имеются, ставят «поздний сифилис» и лечат. Если нет — пациент считается здоровым.
  • Если RPR (или RW/РМП) положительный, РПГА положительный, а ИФА отрицательный (или наоборот: РПГА «-» и ИФА «+»), то результаты анализов вызывают сомнение и рекомендуется отправить кровь в экспертную лабораторию или провести альтернативные анализы (РИФ, Иммуноблоттинг).
  • Если нетрепонемный тест (PMП/RW/RPR) положительный, а трепонемный (РПГА/ИФА) отрицательный, то проводится дополнительный трепонемный тест (ИФА/РПГА). Если он дает положительный результат, то кровь направляют в экспертную лабораторию. Если отрицательный, то диагноз опровергается, а результат нетрепонемного теста признается ложноположительным.

Классификация методов лабораторной диагностики

Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Диагностика сифилиса: как врачи определяют болезнь

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения.

На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода.

Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после лечения раннего сифилиса, через 3 — 6 мес.

— после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит признаком рецидива сифилиса или говорит о повторном заражении.

Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем.

В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др.

Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе,  онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя.

ПОДРОБНЕЕ ПРО:  Гинекологический массаж при бесплодии, лечение бесплодия массажем

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

первичный сифилис у женщин фото

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные.

Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена.

В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др.

С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения.

Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов.

В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.   

 диагностика сифилиса

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления твердого шанкра.

Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, вторичным и рецидивным сифилисом. Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с третичным активным сифилисом, в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

анализ на сифилис

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии.

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями.

При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%.

РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных.

РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

анализ на сифилис микроскопия

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

окраска по Романовскому-Гимзе

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

 реакция иммунофлюоресценции (РИФ) трепонемный тест

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

возбудители сифилиса

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

возбудитель сифилиса

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

колонии бледных трепонем

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

Некоторые пациенты, приходя на обследование к гинекологу или андрологу, не предоставляют объективную информацию о качестве своей половой жизни.

Возможно, причина — в обычном смущении, а может, виной тому является недостаток информации в области венерических заболеваний.

В таблице 1 ниже мы привели возможные результаты анализов и их расшифровку. Как можно видеть в таблице, основное значение при расшифровке имеет комплексная оценка тестов.

Расшифровка результатов серологических реакций на сифилис

Таблица 1 — Расшифровка результатов серологических реакций (анализов крови на сифилис). Для просмотра кликните по таблице

Оценка реактивности тестов выполняется также «крестами»:

  1. 1Максимальный ответ (резко положительная проба) обозначается с помощью 4-х крестов.
  2. 2Положительная проба обозначается с помощью 3-х крестов.
  3. 3Слабоположительную реакцию обозначают двумя крестами.
  4. 4Один крест свидетельствует о сомнительном и отрицательном результате.
  5. 5Отрицательный ответ маркируют знаком «минус».

Проблема оптимизации лабораторной диагностики сифилиса не потеряла свою актуальность до настоящего времени. Современные методы диагностики, несмотря на стремление учёных привести диагностику к максимально высоким показателям чувствительности и специфичности, требуют контрольной проверки и индивидуального подхода.

Особенностью сифилитической инфекции является феномен серорезистентности, который так и не получил научного объяснения. Диагноз выставляется после полноценного обследования больного эпидемиологическими, клиническими, лабораторными методами.

На фоне экономико-технического развития медицины наблюдается и прогресс в разработке новых критериев диагностики сифилиса. Всё это позволит быстро, успешно и безошибочно лечить пациентов.

Где сдавать анализ

Всегда существует вероятность того, что результат теста ошибочный. При расшифровке анализов на сифилис особое внимание следует уделить внешним факторам, не зависящим от пациента. Ошибаться также может лаборант, проводящий исследования или пациент, когда неправильно подготовился к забору крови или не предоставил доктору правдивую информацию о себе. Ложный положительный результат возможен при влиянии следующих факторов:

Красота и здоровье » Болезни » ифа на сифилис

  • Диабет любого типа
  • Наличие в крови наркотических веществ
  • Алкогольное опьянение
  • Заболевания инфекционного типа (корь, гепатит, мононуклеоз и пр.)
  • Доброкачественные или злокачественные новообразования
  • Болезни сердца
  • Прием антибиотиков или недавняя прививка
  • Аутоиммунные заболевания (красная волчанка, ревматоидный артрит и пр.)
  • Беременность
  • Употребление жирной, острой или соленой пищи в течение суток до забора крови

В зависимости от стадии заболевания некоторые тесты не могут выявить заболевание. Так, Реакция Вассермана (РСКт, и РСКк) проводится только спустя 3-4 недели после возможного заражения с вероятностью 100%, при наличии третичного сифилиса достоверность составит всего 75%.

Для диагностики ранних стадий заболевания целесообразно использование ИФА-теста. Анализ представляет собой иммуноферментное исследование с высокой чувствительностью к антителам.

ПОДРОБНЕЕ ПРО:  Бытовой сифилис - передается ли сифилис бытовым путем

Достоверность результата близка к 100%, ложноположительный результат при наличии других заболеваний исключен.

Для исследовательских манипуляций зачастую используют кровь из вены. При определенных ситуациях лаборант может взять нужный образец для диагностики из пальца, либо из спинного мозга.

Промежуток от момента сдачи до получения результатов может быть различным: от одного дня до двух недель. Все будет определяться видом тестирования.

При подготовке к сдаче анализа крови на выявление рассматриваемого недуга нужно придерживаться следующих рекомендаций:

Начинать исследование организма на выявление рассматриваемого недуга следует с неспецифических тестов.

В большинстве случаев врач выписывает направление на МР. Даже, если результат слабоположительный («+»), пациент продолжает обследование — но на этот раз он будет сдавать специфические анализы (зачастую это РИФ и РПГА).

Ни один тест не может дать 100% гарантии того, что человек заражен сифилисом.

Положительный анализ не всегда свидетельствует о заболевании.

Он может быть ложным при следующих явлениях:

  • Инфицирование организма (мононуклеоз, туберкулез).
  • Беременность.
  • Онкозаболевание.
  • Аутоиммунные патологии.
  • Человек ранее был заражен сифилисом и прошел успешное лечение.

Результаты анализов и клинические проявления напрямую зависят от иммунного ответа организма.

Ранний сифилис

Иммуноферментный анализ (сокращенно ИФА) базируется на специфической реакции антиген-антитело. Биологический материал (сыворотка крови пациента, ликвор) вносят в лунки, на твердой поверхности которых фиксированы антигены бледной трепонемы.

Исследуемый материал инкубируют, затем отмывают антитела, не связавшиеся с антигенами (см. рисунок 5).

Идентификация полученного комплекса осуществляется на этапе ферментации с помощью иммунной сыворотки, меченной ферментом. При химической реакции фермент окрашивает полученные комплексы.

Интенсивность окрашивания зависит от количества специфических антител в крови пациента и фиксируется спектрофотометром.

Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

Рисунок 4 — Схема ИФА (иммуноферментного анализа)

Чувствительность ИФА составляет более 95% . Метод используется в автоматизированном режиме для исследования декретируемых групп населения: доноров, беременных и других, для уточнения диагноза при положительных и ложноположительных нетрепонемных тестах.

Одним из самых неожиданных может стать положительный результат теста на сифилис у беременных, особенно если женщина не меняла партнёра. Такая ситуация нередко приводит в ужас будущих мам, поскольку трепонема может негативно влиять на внутриутробное развитие малыша.

Скрининговое исследование при беременности проводится несколько раз:

  • при становлении на учёт, в 12 недель;
  • начало 3 триместра, в 30 недель;
  • перед родами.

Это то количество исследований, которое считается минимальным. Ложноположительный анализ на сифилис может проявляться из-за перестройки организма, происходящей во время беременности.

Когда женщина вынашивает ребёнка, её иммунная система вырабатывает большое количество антител – это эволюционное приспособление для защиты малыша в первый год жизни.

Во время беременности назначают дополнительный уточняющий анализ, который характеризуется большей точностью. Если контрольное исследование показывает наличие возбудителя в организме, обязательно проводится лечение.

Влияние терапии на растущий организм существенно меньше возможного вреда от трепонемы.

Одним из способов предупреждения неправильного результата является подготовка к сдаче анализов. Из-за неправильной подготовки возможно появление реакций, которые сопровождаются выработкой неспецифических антител, что и приводит к появлению неправильного результата.

  • Анализ обязательно нужно сдавать натощак. Можно употреблять только чистую воду.
  • За сутки до забора крови стоит полностью исключить алкоголь – он создаёт дополнительную нагрузку на печень, что может привести к появлению положительного результата.
  • Рекомендуется накануне отказаться от употребления жирной и жареной пищи, острых блюд и большого количества специй.
  • Минимум за 60 минут до анализа рекомендуется воздержаться от курения.
  • Перед забором крови из вены нужно отдохнуть минут 10-15 в приёмном покое.
  • Женщинам не рекомендуется сдавать кровь во время менструаций.
  • Нельзя проводить анализ после рентгенологического исследования, физиотерапевтических процедур.
  • Запрещено сдавать кровь на сифилис в период обострения инфекционных заболеваний.

Обратите внимание! Если пациент принимает какие-либо лекарства, он должен проконсультироваться с врачом перед проведением исследования, может потребоваться перерыв в несколько дней между приёмом препаратов и анализом.

Отправляет пациентов на анализ врач-венеролог. Частные лаборатории делают анонимные исследования на сифилис по желанию клиента. Для сдачи теста в них не нужно направление врача.

Правила проведения исследования:

  • Кровь в лаборатории берут утром на пустой желудок (едят после процедуры). До анализа разрешено пить только воду.
  • За 2 суток до обследования запрещено: питаться жирной едой и употреблять спиртное.
  • Кровь берут из пальца или вены.
  • Сколько длится исследование? Обычно не больше суток. Расшифровку анализов на сифилис получают у лаборантов либо лечащего врача.
  • Сколько действителен тест? По прошествии 3 месяцев результаты анализов теряют силу. Их сдают снова.

Если расшифровка анализа показывает, что тест положителен, необходимо посетить венеролога, который назначит дополнительное обследование для точного подтверждения диагноза и подберет схему необходимого лечения.

Для исключения риска искажения результатов при прохождении анализа необходимо соблюдать правила. Если этого не сделать, возможен ложноположительный анализ на сифилис. Для исключения погрешности, необходимо:

  • Сдавать кровь натощак;
  • Воздержаться за несколько дней от спиртного, жирной пищи и физической утомляемости;
  • Не курить за 2 часа до анализа;
  • Рассказать о принимаемых препаратах, о проведенных недавно прививках, о наличии заболеваний, о состоянии беременности и прочих имеющихся обстоятельствах.

Длительность проведения ИФА на сифилис зависит от загруженности лаборатории и наличии в ней медицинского оборудования.

Иммуноферментный анализ (ИФА; The enzyme linked immunosorbent assay, ELISA) является одним из многочисленных методов серологической диагностики инфекционных заболеваний.

 Иммуноферментный анализ (ИФА) в серодиагностике сифилиса — это тест на антитела классов M, G и A (IgM, IgG, IgA) против антигенов бледной трепонемы.  Возможна постановка ИФА с ликвором.

Внедрение в практику иммуноферментного анализа (ИФА) вместо реакции Вассермана и других кардиолипиновых тестов значительно повысило качество лабораторной диагностики сифилиса. Существенным преимуществом данного метода является возможность автоматизации процесса исследования, что позволяет снизить влияние человеческого фактора. 

1. История метода ИФА

Основные принципы иммуноферментного анализа на поверхности твердофазного носителя разработали E. Engvar и соавтор.

(1971), B. Van Weeman и A.

Schuurs (1971). Разработанный ими иммуноферментный анализ впервые был предложен для диагностики сифилиса в 1975 г.

J. Veldkamp и A.

Visser, которые оценили потенциал этого автоматизированного теста. ИФА начал повсеместно использоваться в диагностике сифилиса в 1980-е гг.

, когда были разработаны и сертифицированы диагностические тесты и стандартизированы методики тестирования. В СССР методику постановки ИФА для диагностики сифилиса разработали B.

Н. Беднова, А.

В. Бабий и А.

В. Котровский (1982, 1983).

2. Принцип метода ИФА

Иммуноферментный анализ (ИФА) по механизму реакции близок к РИФ (выявляются те же антитела). Реакцию иммуноферментного исследования относят к иммунологическим реакциям, основанным на высокоспецифическом взаимодействии антигенов бледной трепонемы с антителами больного сифилисом.

В сифилидологической практике используется в основном непрямой вариант ИФА. Принцип наиболее часто используемого непрямого варианта реакции состоит в следующем.

На поверхности лунок полистиролового планшета фиксируются иммунные комплексы, образующиеся при взаимодействии антител больного сифилисом с антигенами бледной трепонемы.

После этого их выявляют их в цветной реакции с помощью специфических коньюгатов и соответствующих субстратно-хромогенных добавок.

Порядок выполнения теста следующий: на твердофазный носитель с присоединенным к нему антигеном помещается сыворотка больного. При наличии в ней антител, на поверхности носителя образуется комплекс антиген-антитело.

Для «проявления» результатов реакции используются антивидовые антитела к Ig человека, конъюгированные с ферментными маркерами. В случае положительной реакции фермент, присоединившийся к комплексу антиген-антитело, разлагает добавленный в систему субстрат, в результате чего развивается цветное окрашивание разной интенсивности.

В реакции определения комплекса сорбированных на твердой фазе АГ и АТ проводят с помощью антиглобулиновых антител, меченных ферментом, по цветной реакции фермента с субстратом. 

В реакции определение комплекса сорбированных на твердой фазе антигенов и антител проводят с помощью антиглобулиновых антител, меченных ферментом. 

ИФА представляет возможность выявления сывороточных Ig разных классов. На рынке представлены системы, позволяющие определять раздельно IgM и IgG и суммарные антитела. 

С развитием лабораторной диагностики в условиях модернизации здравоохранения РФ в практику лабораторий вошла автоматизация лабораторных исследований, которая позволяет стандартизовать аналитические этапы исследований.

Это способствует повышению качества диагностики. С внедрением автоматизации стали применяться новые высокотехнологичные методы, обладающие высокой чувствительностью и специфичностью, такие как иммунохемилюминесцентный анализ (ИХА) (chemiluminescence immunoassay — CLIA).

Как подготовиться к процедуре

Для анализа крови на сифилис в разных случаях могут брать капиллярную или венозную кровь. Домашние экспресс-тесты дают ответ по одной капле крови из пальца.

В этом случае специальной подготовки не требуется. Общая рекомендация: воздерживаться от курения непосредственно перед взятием пробы, а от алкоголя – на протяжении 24 часов.

ИФА на сифилис: как проводится анализ

Похожие требования выдвигаются и при заборе венозной крови. Для пациентов, имеющих проблемы с иммунитетом, дополнительно не советуют заниматься тяжелым физическим трудом накануне анализов. За день до взятия проб лучше употреблять легкую пищу, хорошо выспаться.

Сдача венозной крови проводится утром натощак.

Adblock
detector